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电穿孔之活体电穿孔法的基本知识

发布时间:2012-10-18

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产品类型:003

产品规格:003

产品总量:1000

信息描述

电穿孔之活体电穿孔法的基本知识

   电穿孔之活体电穿孔法的基本知识

    活体电穿孔法(invivoelectroporation)是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。

由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很

简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~115μm,这种通道能维持

几毫秒到几秒,然后自行恢复。在此期间生物大分子如DNA可通过这种微小的通道进入细胞。活体电穿

孔法用于转基因研究的报道不断增多,在基因治疗方面的优势也日趋显著,是一种很好的活体基因导入

方法。

  特点:活体电穿孔法可用于检测瞬时表达系统中载体的表达状况。大量的研究表明活体电穿孔法在

基因治疗方面有非常好的应用前景。因此中国外对活体电穿孔法介导外源基因转移的研究越来越多。

  活体电穿孔http://www.jntckj.cn/法基因导入和表达效率较高,它的特点主要在以下几个方面:
  首先,靶器官的选择面广,理论上任何组织和器官都可以作为活体电穿孔的靶器官。
  在用于基因治疗方面,要考虑到靶器官组织生理特性。如果所选择的局部组织细胞不能把所转移基

因的表达产物分泌到外周血液循环中,则在某种意义上说已失去了基因导入的价值,这在基因治疗中是

关键性的问题。当使用组织特异性表达载体时,研究人员应根据所构建的表达载体来选择基因转移和表

达的靶器官组织。例如鱼精蛋白21启动子可指导外源基因在精母细胞中特异性表达,以小鼠的**作为

靶器官将含有鱼精蛋白21启动子的表达载体导入,获得外源基因的表达量远远高于该基因在肝脏和骨骼

肌中的表达。
  其次,对导入的外源基因片段的大小没有限制,从几KB或十几KB的表达载体,到100~200KB的YAC

、BAC基因组,都有成功导入并获得表达的报道。
  此外活体电穿孔法操作简单快速,电穿孔的时间只有几秒钟,而且DN**段不需要特殊的纯化操作


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